1、双脱氧链末端终止法
基本原理：双脱氧链末端终止法通过使用链终止剂—类似于正常dNTP的2’,3’-双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)，将延伸的DNA链特异性地终止。
其反应体系也包括单链模板、引物、4种dNTP和DNA聚合酶。
共分四组，每组按一定比例加入一种(ddNTP)，它能随机渗入合成的DNA链，一旦渗入合成即终止，于是各种不同大小片段的末端核苷酸必定为该种核苷酸，可以从放射自显影带上直接阅读DNA的核苷酸序列。
Sanger DNA测序仪的发展历程
?1977: Sanger DNA法测序概念被提出
?1986:Hood and Smith 荧光标记ddNTP被用于电泳
?1987:第一台自动测序仪产生
?1990:毛细管电泳被应用在DNA测序上
?2003:人类基因组测序工作完成
sequencing——denaturation——annealing——extension
测序-变性-退火-扩展
转载于:https://www.cnblogs.com/MiLu/p/4015474.html
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